Alphagenics Diaco Biotechnologies

Alphawatch e Alphatype: PCR-ELISA SYSTEM

Il sistema è basato sull'estrazione del materiale genetico, DNA o RNA, da fluidi biologici, tessuti freschi, tessuti congelati o paraffinati (questi provenienti prevalentemente dai laboratori di anatomia patologica). Si esegue dapprima l'amplificazione di una regione genomica conservata utilizzando primers marcati con digossigenina e il prodotto di pcr così ottenuto viene ibridato con una sonda universale specifica, complementare alla parte interna del prodotto stesso. La sonda specifica è a sua volta marcata con biotina e, in un secondo passaggio, va a legarsi covalentemente alla streptavidina coattata sulla superficie del pozzetto della micropiastra elisa. In questo modo viene consentita l'immobilizzazione dell'ibrido "prodotto di pcr/sonda specifica". La specificità del test è garantita dal fatto che i prodotti di amplificazione aspecifici non si ibridano con la sonda e vengono rimossi durante i lavaggi successivi, effettuati in condizione di massima stringenza. Al contrario, l'ibrido legato alla micropiastra elisa in modo specifico viene rivelato da un anticorpo anti-digossigenina, coniugato alla perossidasi, mediante l'uso di un substrato colorimetrico (abts). Per ottenere il risultato del saggio, viene letta l'assorbanza dei singoli pozzetti tramite un lettore di micropiastre elisa ad una lunghezza d'onda pari a 405 nm (considerare come riferimento un filtro di lunghezza d'onda pari a 492 nm).

La sensibilità del sistema è pari a 30–50 genomi/campione.

Schema del metodo Schema PCR

N.B. I sistemi ALPHAWATCH (per lo screening) ed ALPHATYPE (per la tipizzazione) utilizzano entrambi la tecnologia
PCR-ELISA descritta nella figura a pagina precedente, ma risultano differenti per:
1. scelta delle sonde che ibridano con il DNA amplificato
2. condizioni di stringenza dei passaggi di ibridazione e di lavaggio.

	Prodotto	Categoria	N°test	Codice	A
	AlphaWatch Borrelia burgdorferii	Batteriologia	48	BT-310.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza di Borrelia burgdorferii in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da urine, fluidi respiratori (BAL), tessuto istologico paraffinato, urine.
	AlphaWatch Chlamydia pneumoniae	Batteriologia	48	BT-309.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza di Chlamydia pneumoniae in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da urine, fluidi respiratori (BAL), tessuto istologico fresco (biopsia).
	AlphaWatch Chlamydia tracomatis	Batteriologia	48	BT-308.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza di Chlamydia tracomatis in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da urine o liquido lacrimale.
	AlphaWatch Helicobacter pylori DNA	Batteriologia	48	BT-302.48.12
Sistema che consente di rilevare la presenza di Helicobacter pylori e di tipizzare il gene dell'antigene associato alla citotossina cagA e i geni ureC e VacA in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da biopsia fresca o congelata, succo gastrico, feci.
	AlphaWatch Mycobacterium tb	Batteriologia	48	BT-303.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza dei più comuni Mycobacteria e del Mycobacterium tubercolosis complex in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da tessuto istologico fresco (biopsia) o paraffinato, fluidi respiratori (BAL), espettorato, coltura cellulare.
	AlphaType Aspergillus	Micologia	24	MC-203.24.12
Sistema che consente di rilevare la presenza e di identificare Aspergillus fumigatus, A. niger, A. terreus, A. flavus in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da fluidi respiratori (BAL) o urine.
	AlphaType Candida	Micologia	24	MC-204.24.12
Sistema che consente di rilevare la presenza e di identificare i funghi del genere Candida in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da fluidi respiratori (BAL), urine o sangue intero.
	AlphaType P 53 Codon72	Oncologia	48	TD-422.48.12
Sistema che consente di determinare la predisposizione genetica (omozigosi p53Arg/p53Arg) allo sviluppo di un tumore alla cervice uterina in donne positive allo screening per HPV ad alto rischio (genotipi 16 e 18), tramite estrazione del DNA del campione, amplificazione in PCR e rivelazione in ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere qualunque fonte di DNA proveniente dal paziente.
	AlphaWatch C-myc mRNA	Oncologia	24	TD-504.24.12
Sistema che consente di determinare l'eccedenza di trascritto dell'esone 3 di C-myc presente nei tumori alla mammella, alle ovaie, alla cervice uterina, al polmone, alla prostata, alla pelle e nei linfomi e nelle leucemie, tramite estrazione dell'RNA del campione, amplificazione in RT-PCR e rivelazione in ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da sangue intero o tessuto istologico fresco (biopsia)
	AlphaWatch PSM II mRNA	Oncologia	24	TD-510.24.12
Sistema che consente di determinare la presenza di cellule prostatiche in circolo con elevati quantitativi di PSM e pertanto metastatiche, tramite estrazione dell'RNA del campione, amplificazione in RT-PCR e rivelazione in ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da sangue intero, tessuto istologico fresco (biopsia) o congelato.
	AlphaWatch THYR mRNA	Oncologia	24	TD-511.24.12
Sistema che consente di determinare la presenza di cellule di melanoma in circolo con elevati quantitativi di THYR e pertanto metastatiche, tramite estrazione dell'RNA del campione, amplificazione in RT-PCR e rivelazione in ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da sangue intero, tessuto istologico fresco (biopsia) o congelato.
	AlphaType I HPV	Virologia	24	VR-121.24.12
PCR – ELISA (tipizzazione alto rischio) Sistema che consente di rilevare la presenza e di tipizzare gli 8 genotipi di papillomavirus (HPV) appartenenti al gruppo anogenitale definiti ad "alto rischio" in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da PAP smear, tampone vaginale, tessuto istologico paraffinato, sperma.
	AlphaType I HPV/R	Virologia	24	VR-121.24.12/R
PCR – ELISA (tipizzazione alto rischio – solo rivelazione) Sistema che consente di tipizzare gli 8 genotipi di papillomavirus (HPV) appartenenti al gruppo anogenitale definiti ad "alto rischio" in campioni biologici, tramite amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Sistema di sola rivelazione. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da PAP smear, tampone vaginale, tessuto istologico paraffinato, sperma.
	AlphaType II HPV	Virologia	12	VR-122.12.12
PCR – ELISA (tipizzazione basso/medio rischio) Sistema che consente di rilevare la presenza e di tipizzare i 16 genotipi di papillomavirus (HPV) appartenenti al gruppo anogenitale definiti a "basso e medio rischio" in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da PAP smear, tampone vaginale, tessuto istologico paraffinato, sperma.
	AlphaType II HPV/R	Virologia	12	VR-122.12.12/R
PCR – ELISA (tipizzazione basso/medio rischio – solo rivelazione) Sistema che consente di tipizzare i 16 genotipi di papillomavirus (HPV) appartenenti al gruppo anogenitale definiti a "basso e medio rischio" in campioni biologici, tramite amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Sistema di sola rivelazione. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da PAP smear, tampone vaginale, tessuto istologico paraffinato, sperma.
	AlphaWatch EBV	Virologia	48	VR-126.48.12
istema che consente di verificare la presenza del virus erpetico Epstein Barr (EBV) in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da tessuto istologico fresco (biopsia) o paraffinato.
	AlphaWatch Enterovirus	Virologia	24	VR-128.24.12
AlphaWatch Enterovirus Sistema che consente di verificare la presenza di Poliovirus, Coxachievirus A e B, Echovirus (Enterovirus) in campioni biologici, tramite estrazione dell'RNA, amplificazione in RT-PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da tampone oro-faringeo o materiale fecale.
	AlphaWatch HPV	Virologia	48	VR-119.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza dei papillomavirus (HPV) appartenenti al gruppo anogenitale in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da PAP smear, tampone vaginale, tessuto istologico paraffinato, sperma.
	AlphaWatch HSV 1/2	Virologia	48	VR-123.48.12
Sistema che consente di verificare la presenza del virus erpetico Erpes Simplex (HSV) di tipo 1 e 2 in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da vescicole ulcerose, liquido amniotico, liquido cefalorachidiano, urine, siero, plasma, sangue intero, fluidi respiratori (BAL).
	AlphaWatch Parvo B19	Virologia	24	VR-127.24.12
Sistema che consente di verificare la presenza del Parvovirus B19 in campioni biologici, tramite estrazione del DNA, amplificazione in PCR e rivelazione con metodica ELISA. Il materiale biologico di partenza può essere estratto da liquor, liquido cefalorachidiano, sangue intero.